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宠物检测荧光PCR技术的优势有哪些?

更新时间:2023-05-26      点击次数:273
  宠物检测荧光PCR是一种基于DNA复制和扩增的技术,其适用于检测特定序列的DNA,并从中获得更多或全部的DNA。PCR可以在短时间内产生大量纯的、具有特定序列的DNA分子,是现代分子生物学的基础技术之一。而荧光PCR则是一种在传统聚合酶链反应的基础上加入荧光探针以实现更准确的检测方法。
 
  原理是这样的:先需要收集需要检测的宠物样本,如口腔拭子、血液或组织等样本。然后需要使用热解法将其中的DNA裂解,使其变为单链。接着添加两个特异性引物单元,即“前向引物”和“反向引物”,并加入荧光探针,该探针含有一个荧光染料和一个淬灭染料,可以与细胞外核酸(GC)结合。当引物与模板相互作用时,在3'端区域上进行扩增,此时探头发生水解,导致荧光染料从淬灭染料释放,并且发生荧光信号释放,以此来检测PCR反应产物。可以通过实验室设备观察PCR反应体系中荧光信号变化的趋势,即可对样品DNA进行定量或定性分析。
 
  利用特定引物扩增所有目标区域内存在的DNA,引物的设计根据目标序列的基本信息选择合适的引物序列,使其在PCR过程中,能够按照特定规则稳定地结合到待扩增模板的特定位置上。与普通PCR不同,荧光PCR选用带有荧光生物素标签的引物,可以将扩增的目标串联片段和引物结合成一个分子。通过Real-timePCR系统可以同时进行扩增反应和融合曲线分析。这样,在后期的荧光检测过程中,就可以对所扩增目标片段的数量进行准确的定量。
 
  宠物检测荧光PCR技术的其他优势还包括:
 
  高度灵敏性:可以从非常小的样本量开始扩增,探测样本中确定污染,扩增低拷贝的模版。
 
  高速度:相比传统PCR技术,不需要进行后续电泳与染色分析,可以在更短的时间内完成检测。
 
  高热稳定性引物和荧光探针被特意设计,确保了其在高温下不会失活或降解。
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