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程序降温盒使用经验分享

更新时间:2021-11-13      点击次数:1250
  冻存细胞时要缓慢冷冻,程序降温,以提高细胞的存活率。目前普遍的做法是采用程序降温仪或程序降温盒,采用程序降温仪价格昂贵、操作繁琐,而程序降温盒在生物学实验室中广泛使用,是细胞冻存盒类产品的经典实验耗材之一。
  程序降温盒包括盒盖、盒身和管槽,管槽置于盒身内,盒盖盖于盒身上且与盒身螺纹配合,还包括连接带,连接带一端与盒盖连接,另一端与盒身连接;本实用新型设置了连接盒盖与盒身的连接带,使盒盖与盒身不分离,减少了配对标记这一步骤,减少了操作程序,使用更加方便;同时,本实用新型出入超低温冰箱时,可手提连接带,减少了手的接触面积,减少或防止冻伤;另外,管槽与盒身螺纹配合,增加了密封度,防止了异丙醇挥发而导致的冻存效果变差。
  程序降温盒使用经验分享:
  经验1:我们实验室冻存盒平时放4度,需要冻细胞时直接拿出来用就可以了。第二天转移至液氮,贵重的细胞尽快转移,不然会影响复苏成活率的。一般是用5次就更换一下异丙醇。现在也有一些商品化冻存液可以直接丢进-80的,很方便,效果也不错的。
  经验2:异丙醇的量是要保证的,不能低于表明的线,否则不能起到很好的程序性降温作用,我们是在4度放置,放了细胞后立马放到-80度冰箱,第二天再转移到液氮,效果很不错。异丙醇熔点:-87.9度的色透明具有乙醇气味的可燃性有毒液体。注意了有可燃性!急性毒性:口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤。刺激数据:眼睛-兔子100毫克/!请注意清理!
  经验3:应该不可以把冻存盒放4°的,因为梯度降温的起始点是室温20°左右,所以从-80℃拿出来的冻存盒应该现在室温静置一段时间待其恢复到室温再使用。而其中的异丙醇应使用6~7此后更换一次,而且保证液体量达到刻度线,否则降温效果会受到影响。
  经验4:冻存盒里的异丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理论上是5次以后更换异丙醇,但是异丙醇对环境有害,我们可以多用几次,只是少了的时候要加满。还有冻存液里面的DMSO对细胞有毒性,尤其是室温的时候,所以冻存盒和冻存液先放4°,等把细胞用冻存液重悬好了放在冻存盒里,还放回4°,等到出细胞间的时候再拿到-80°里面保存。过夜再转入液氮。
  程序降温盒这个梯度降温可大大提高细胞冻存的存活率,由于程序降温盒内存在100%浓度的异丙醇和泡沫内衬,因此程序降温盒也可以用于细胞复苏。
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